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Registro Completo |
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Biblioteca(s): |
Embrapa Unidades Centrais. |
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Data corrente: |
05/05/2006 |
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Data da última atualização: |
09/05/2006 |
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Autoria: |
GITAHY, P. de M.; LIMA, G. M. de S.; ARAÚJO, J. L. S.; SOUZA, M. T. de; BALDANI, J. I. |
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Título: |
Purificação de DNA plasmidial de Bacillus thuringiensis por ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio. |
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Ano de publicação: |
2005 |
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Fonte/Imprenta: |
Seropédica: Embrapa Agrobiologia, 2005. |
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Páginas: |
20 p. |
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Série: |
(Embrapa Agrobiologia. Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento, 8). |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
DNA plasmid. Bacillus thuringiensis e seus plasmídeos. Purificação de DNA plasmidial por ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio (CsCl). Estirpes utilizadas neste trabalho. Condições de crescimento e extração de DNA plasmidial. Preparo do DNA plasmidial e ultracentrifugação gradiente de CsCl. Identificação e coleta das bandas de interesse. Análise eletroforética. Bacillus thuringiensis é uma bacteria que sintetiza delta-endotoxinas letais para diferentes grupos de insetos, sendo a maior responsável pelo mercado ,mundial de bioinseticidas. As proteínas tóxicas são codificadas por genes denomonados cry, presentes em plasmídeos conjugativos com mais de 30 Mda, e que geralmente, são difíceis de serem purificados pelos métodos rotineiros de extração e purificação. O objetivo deste trabalho foi ajustar um metodologia para obtenção dos plasmídeos presentes nas estirpes de B. thuringiensis, a partir da técnica de ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio. Neste caso, foram usados como modelo as estirpes HD-1 e S76 da subespécies kurstaki. O método de lise alcalina e purificação em gradiente de cloreto de césio empregado, permitiu a obtenção de grandes quantidades de DNA plasmidial com alto grau de pureza. Foram realizadas adaptações no protocolo original que tornaram o protocolo utilizado para as estirpes HD-1 e S76 uma técnica menos laboriosa e mais rápida. Ainda houve redução significativa na quantidade de brometo de etídeo empregada e na quantidade de resíduos químicos sólidos contaminados com essa substância, extremamente tóxica, que foram usados no processo. O procedimento de purificação descrito fio um método adaptado para purificação dos pequenos e grandes plasmídeos de B. thuringiensis e foi usado com sucesso para as estirpes HD-2 e S76. Bacillus thuringiensis is a Gram positive bacterium that synthesizes delta-endotoxinas lethal to different groups of insects therefore has been the largest responsible for the worlf market of bioinseticidas. The toxic proteins are coded by genes denominated cry, persents in conjugatives plasmids with more than 30 Mda and that generally are difficult to be purified by the routine methods of extraction and purification. The objective of this work was to adjust the ultracentrifugation methodology in gradient of cesium chloride to obtain purified plasmids in HD-1 and S76 strains of B. thuringiensis subsp. Kurstaki. The procedure allwed to obtain great amounts of plasmids DNA from HD-1 and S76 strains with high degree of purity. In addition, it was less laborious and much faster. Besides, there was significant reduction in the amounts of ethidium bromide and of solid chemical residues contaminated with the toxic substance. The described protocol is a modification of a purification method for small and big plasmids of B. huringiensis strains and could be applied with sucess for strains the HD-1 and S76. MenosDNA plasmid. Bacillus thuringiensis e seus plasmídeos. Purificação de DNA plasmidial por ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio (CsCl). Estirpes utilizadas neste trabalho. Condições de crescimento e extração de DNA plasmidial. Preparo do DNA plasmidial e ultracentrifugação gradiente de CsCl. Identificação e coleta das bandas de interesse. Análise eletroforética. Bacillus thuringiensis é uma bacteria que sintetiza delta-endotoxinas letais para diferentes grupos de insetos, sendo a maior responsável pelo mercado ,mundial de bioinseticidas. As proteínas tóxicas são codificadas por genes denomonados cry, presentes em plasmídeos conjugativos com mais de 30 Mda, e que geralmente, são difíceis de serem purificados pelos métodos rotineiros de extração e purificação. O objetivo deste trabalho foi ajustar um metodologia para obtenção dos plasmídeos presentes nas estirpes de B. thuringiensis, a partir da técnica de ultracentrifugação em gradiente de cloreto de césio. Neste caso, foram usados como modelo as estirpes HD-1 e S76 da subespécies kurstaki. O método de lise alcalina e purificação em gradiente de cloreto de césio empregado, permitiu a obtenção de grandes quantidades de DNA plasmidial com alto grau de pureza. Foram realizadas adaptações no protocolo original que tornaram o protocolo utilizado para as estirpes HD-1 e S76 uma técnica menos laboriosa e mais rápida. Ainda houve redução significativa na quantidade de brometo de etídeo empregada e na quantidade de resídu... Mostrar Tudo |
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Thesagro: |
Ácido Nucléico; Bactéria; DNA. |
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Categoria do assunto: |
-- |
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Marc: |
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Registro original: |
Embrapa Unidades Centrais (AI-SEDE) |
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Biblioteca |
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Tipo/Formato |
Classificação |
Cutter |
Registro |
Volume |
Status |
URL |
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Registro Completo
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Biblioteca(s): |
Embrapa Semiárido. |
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Data corrente: |
24/07/2015 |
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Data da última atualização: |
07/08/2018 |
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Tipo da produção científica: |
Circular Técnica |
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Autoria: |
FLORI, J. E.; SANTOS, C. A. F.; PINTO, J. M. |
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Afiliação: |
JOSE EGIDIO FLORI, CPATSA; CARLOS ANTONIO FERNANDES SANTOS, CPATSA; JOSE MARIA PINTO, CPATSA. |
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Título: |
Propagação vegetativa de goiabeira por enraizamento de estacas. |
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Ano de publicação: |
2015 |
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Fonte/Imprenta: |
Petrolina: Embrapa Semiárido, 2015. |
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Páginas: |
3 p. |
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Série: |
(Embrapa Semiárido. Circular técnica, 109). |
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ISSN: |
1808-9976 |
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Idioma: |
Português |
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Conteúdo: |
Na cultura da goiabeira (Psidium guajava L.), o processo de multiplicação é realizado, normalmente, por propagação vegetativa, conhecido como multiplicação clonal. Com a utilização desse método, mantêm-se as características genéticas originais da planta matriz. Nesse sistema de propagação, o enraizamento de estacas é o método mais praticado comercialmente. Outros métodos também são utilizados como a enxertia por garfagem de fenda cheia ou utilização da borbulhia. Esses processos se diferenciam do enraizamento basicamente pelo tempo de duração da produção da muda e pela característica do sistema radicular da planta. Neste caso, pivotante, por se originar de porta-enxertos obtidos de sementes. |
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Palavras-Chave: |
Enxertia por garfagem; Multiplicação clonal; Recomendação de cultivo. |
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Thesagro: |
Enraizamento de Estaca; Goiaba; Propagação Vegetativa; Psidium Guajava. |
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Thesaurus NAL: |
Guavas; Plant propagation; Vegetative propagation. |
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Categoria do assunto: |
A Sistemas de Cultivo |
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URL: |
https://ainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/126935/1/CTE109-2015.pdf
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Marc: |
LEADER 01572nam a2200289 a 4500
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520 $aNa cultura da goiabeira (Psidium guajava L.), o processo de multiplicação é realizado, normalmente, por propagação vegetativa, conhecido como multiplicação clonal. Com a utilização desse método, mantêm-se as características genéticas originais da planta matriz. Nesse sistema de propagação, o enraizamento de estacas é o método mais praticado comercialmente. Outros métodos também são utilizados como a enxertia por garfagem de fenda cheia ou utilização da borbulhia. Esses processos se diferenciam do enraizamento basicamente pelo tempo de duração da produção da muda e pela característica do sistema radicular da planta. Neste caso, pivotante, por se originar de porta-enxertos obtidos de sementes.
650 $aGuavas
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650 $aEnraizamento de Estaca
650 $aGoiaba
650 $aPropagação Vegetativa
650 $aPsidium Guajava
653 $aEnxertia por garfagem
653 $aMultiplicação clonal
653 $aRecomendação de cultivo
700 1 $aSANTOS, C. A. F.
700 1 $aPINTO, J. M.
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Registro original: |
Embrapa Semiárido (CPATSA) |
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